概述
多通道荧光与高分辨率成像支撑药物筛选与细胞分析。
背景与研究场景
Jonathan Rocheleau是多伦多大学生物材料与生物医学工程研究所的副教授。他的实验室使用高含量成像来研究胰岛生物学。
Rocheleau博士告诉我们， “我们做高含量显微镜检查是因为我们对细胞代谢是异质的这一观点感兴趣-一些β细胞在代谢上处于增殖或存活的状态，而另一些细胞则准备分泌胰岛素。“ Rocheleau博士继续说道， ”我们创造了一种用于测量各向异性传感器的高含量显微镜，我们称之为阿波罗。我们从响应NADP +的传感器开始，但相信使用这种设计开发更多传感器有很大的潜力。
表达线粒体Apollo-NADP + （顶行， mTurquoise2 ）、Apollo-NADP + （中行， Venus ）和mCherry （底行）的AD293细胞在63X放大率下的三色各向异性测量。
技术挑战
在本应用中，使用具有非常稳定的读数和噪声特性的相机对于精确测量至关重要。Rocheleau博士解释说： “各向异性成像非常精确。这是我们正在进行的光物理测量。对于其他传感器，您经常会看到显示为代表性痕迹的数据。各向异性成像的精度使我们能够在许多不同的细胞中收集和整理数据，实验之间几乎没有漂移。”
以前使用的相机上较小的视野限制了单个实验中可以记录的事件数量。“当我们使用具有较小芯片的相机进行63倍成像时，我们一次只能对数十个细胞进行成像。我们需要做成千上万个细胞的种群，你必须将大量的图像平铺在一起。当你平铺并需要成像时，所有这些都需要时间。”
成像方案与成果
IRIS 15的25毫米视场使其成为高内容成像应用的绝佳相机，使Rocheleau博士的团队能够在将多个图像投影到单个传感器上时对更多细胞进行成像并消除平铺的需要。Rocheleau博士告诉我们： “我们喜欢Iris 15芯片这么大。未来，我们希望在同一芯片上同时收集平行和垂直荧光。相机为我们提供了如此多的信息，使我们能够收集大量的数据。”
此外， IRIS 15在宽波长范围内的噪声稳定性和灵敏度使实验室能够使用各种发射波长的荧光传感器来定制其成像需求。Rocheleau博士总结道： “通过这种传感器，我们可以获得非常精确的测量结果。测量的精度每天都非常高，我们可以很好地在实验之间进行比较。”
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